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碱裂解法质粒提取试剂配方
发布时间:2018-06-13 10:18:34 | 浏览次数:


S1

Tris•HCl                50mM

Na2EDTA·2H2O         10mM

RNAse A               100ug/mL(用时再加)(国药或者浩然生物)

PH8.0                  8.0

800ml H2O溶解6.06gTris3.72g  Na2EDTA·2H2O,调节PH8.0,加水定容到1L。加酶后保存于4度。

S2

NaOH     200mM

SDS       1%

900ml H2O溶解8.0gNaOH,,加入100ml 10% SDS.

S3

盐酸胍      4.09M

乙酸钾      0.759M

700ml H2O溶解74.49g乙酸钾,390.72g盐酸胍,冰醋酸调节PH至4.2。加水至1L。过滤除菌

 

漂洗液W2

乙酸钾                           50mM

Na2EDTA·2H2O                    83.5uM

PH                               5.0

乙醇                             80%(用时再加)

 

基础液:800ml ddH2O溶解4.907g乙酸钾,加入167ul 0.5M Na2EDTA·2H2OPH8.0)溶液,用冰醋酸调节到PH5.0,加水至1L。过滤除菌。

200ml基础液,加入800ml乙醇。

 

洗脱缓冲液TE

1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制:称取Tris6.06 g,加超纯水40 ml溶解,滴加浓HCl2.1 mlpH8.0,定容至50 ml

0.5 M EDTApH 8.050 ml的配制:称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g,加超纯水35 ml,剧烈搅拌,用约1 g NaOH颗粒调pH8.0,定容至50 ml。(EDTA二钠盐需加入NaOHpH调至接近8.0时,才会溶解。)

 

1×TE10 mM Tris-HClpH 8.01 mM EDTApH 8.0)的配制

1 M Tris-HClpH 8.0 

1 ml

0.5 M EDTApH 8.0  

0.2ml

超纯水至        

100 ml

 

 

 

 

 

 

 

 

 

以上为试剂盒溶液配方,

还需要吸附DNA的柱子,

最好能有一个过滤柱,

解决过滤加入S3后离心不能完全沉淀的情况。

 
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