pABAi 酵母单杂交载体 | ||||||||||||||||||||||
发布时间:2018-05-28 12:06:31 | 浏览次数: | ||||||||||||||||||||||
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pABAI载体基本信息:
pAbAi is a yeast reporter vector that can be used in one-hybrid assays to identify and characterize DNA-binding proteins. The vector, which was specifically designed for use with the Matchmaker™ Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System (Cat. No. 630491), contains a multiple cloning site (MCS) upstream of the yeast iso-1-cytochrome C minimal promoter(not shown) and the AUR1-C gene, an antibiotic resistance gene that confers resistance to Aureobasidin A (AbA; Cat. No. 630466). A cis-acting element (i.e., a target sequence) can be inserted into the MCS and used as bait to screen GAL4 AD/cDNA fusion libraries (e.g. Mate & Plate™ Libraries) for proteins that interact with the target sequence. Positive protein-DNA (i.e.,one-hybrid) interactions drive the expression of AUR1-C. As a result, one-hybrid interactions can be detected by selecting for yeast that are resistant to AbA. pAbAi cannot be propagated episomally in yeast; it can only be stably maintained through integration into the host genome. Integration is accomplished via homologous recombination between the vector’s URA3 gene and the ura3-52 locus of the yeast strain provided in theMatchmaker Gold Yeast One-Hybrid System. URA3 is a nutritional marker that can also be used for selection of recombinant yeast (1, 2). The vector also contains a Col E1 origin of replication and an ampicillin resistance gene (Ampr) for propagation and selection in E.coli.
全序列
1 AAGCTTGAAT TCGAGCTCGG TACCCGGGGA TCTGTCGACC TCGAGGCATG TGCTCTGTAT
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