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抗体表达质粒

pEE12.4 GS系统 CHO 细胞蛋白表达载体 抗体表达质粒
发布时间:2018-05-27 21:01:42 | 浏览次数:


测序及更多信息:https://pan.baidu.com/s/1lIyQrf8P-wJiCFT8MEH3Fw 密码:usen

采购地址:淘宝店铺地址

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pEE 12.4载体基本信息

出品公司:

Lonza biologics

 

载体名称:

pEE12.4, pEE 12.4

 

质粒类型:

哺乳动物细胞蛋白表达载体

 

高拷贝/低拷贝:

高拷贝

 

启动子:

hCMV-MIE

 

克隆方法:

多克隆位点,限制性内切酶

 

载体大小:

7569 bp

 

5' 测序引物及序列:

CMV-Forward

 

3' 测序引物及序列:

--

 

载体抗性:

氨苄

筛选标记:

GS (Glutamine Synthetase, 谷氨酰胺合成酶)

备注:

配套细胞是NSO细胞或者CHOK1SV细胞

产品目录号:

--

稳定性:

稳定表达

组成型:

--

病毒/非病毒:

非病毒


pEE 12.4载体简介

Lonza生物公司的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表达系统,利用谷氨酰胺合成酶筛选标记,能够高水平的在哺乳细胞内表达目的基因。

GS酶是生物体内以谷氨酸和氨为底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能够被甲硫氨酸砜亚胺(methionine sulphoximine,MSX)选择性的抑制。一些哺乳动物细胞,例如小鼠骨髓瘤细胞(NSO细胞系)无法表达GS,所以在不添加谷氨酰胺的情况下,细胞将无法生长。对于这些细胞系,在无谷氨酰胺的培养基内,一个转染的GS基因可以作为一个筛选标记。其他的一些细胞系,例如CHO-KI,能够产生内源性的GS酶。对于这些细胞,在无谷氨酰胺培养基内,在高水平足够抑制GS酶合成的MSX(甲硫氨酸砜亚胺)的作用下,可以对细胞的生长提供一个选择压力。

1992年,Bebbington等首次报道了使用GS基因细胞系统表达重组的抗体。该载体能够被用来构建快速,高产量,稳定的单克隆抗体表达细胞系。



1        GCCGATAGAG GCGACATCAA GCTGGCACAT GGCCAATGCA TATCGATCTA TACATTGAAT
61       CAATATTGGC CATTAGCCAT ATTATTCATT GGTTATATAG CATAAATCAA TATTGGCTAT
121      TGGCCATTGC ATACGTTGTA TCCATATCAT AATATGTACA TTTATATTGG CTCATGTCCA
181      ACATTACCGC CATGTTGACA TTGATTATTG ACTAGTTATT AATAGTAATC AATTACGGGG
241      TCATTAGTTC ATAGCCCATA TATGGAGTTC CGCGTTACAT AACTTACGGT AAATGGCCCG
301      CCTGGCTGAC CGCCCAACGA CCCCCGCCCA TTGACGTCAA TAATGACGTA TGTTCCCATA
361      GTAACGCCAA TAGGGACTTT CCATTGACGT CAATGGGTGG AGTATTTACG GTAAACTGCC
421      CACTTGGCAG TACATCAAGT GTATCATATG CCAAGTACGC CCCCTATTGA CGTCAATGAC
481      GGTAAATGGC CCGCCTGGCA TTATGCCCAG TACATGACCT TATGGGACTT TCCTACTTGG
541      CAGTACATCT ACGTATTAGT CATCGCTATT ACCATGGTGA TGCGGTTTTG GCAGTACATC
601      AATGGGCGTG GATAGCGGTT TGACTCACGG GGATTTCCAA GTCTCCACCC CATTGACGTC
661      AATGGGAGTT TGTTTTGGCA CCAAAATCAA CGGGACTTTC CAAAATGTCG TAACAACTCC
721      GCCCCATTGA CGCAAATGGG CGGTAGGCGT GTACGGTGGG AGGTCTATAT AAGCAGAGCT
781      CGTTTAGTGA ACCGTCAGAT CGCCTGGAGA CGCCATCCAC GCTGTTTTGA CCTCCATAGA
841      AGACACCGGG ACCGATCCAG CCTCCGCGGC CGGGAACGGT GCATTGGAAC GCGGATTCCC
901      CGTGCCAAGA GTGACGTAAG TACCGCCTAT AGAGTCTATA GGCCCACCCC CTTGGCTTCT
961      TATGCATGCT ATACTGTTTT TGGCTTGGGG TCTATACACC CCCGCTTCCT CATGTTATAG
1021     GTGATGGTAT AGCTTAGCCT ATAGGTGTGG GTTATTGACC ATTATTGACC ACTCCCCTAT
1081     TGGTGACGAT ACTTTCCATT ACTAATCCAT AACATGGCTC TTTGCCACAA CTCTCTTTAT
1141     TGGCTATATG CCAATACACT GTCCTTCAGA GACTGACACG GACTCTGTAT TTTTACAGGA
1201     TGGGGTCTCA TTTATTATTT ACAAATTCAC ATATACAACA CCACCGTCCC CAGTGCCCGC
1261     AGTTTTTATT AAACATAACG TGGGATCTCC ACGCGAATCT CGGGTACGTG TTCCGGACAT
1321     GGGCTCTTCT CCGGTAGCGG CGGAGCTTCT ACATCCGAGC CCTGCTCCCA TGCCTCCAGC
1381     GACTCATGGT CGCTCGGCAG CTCCTTGCTC CTAACAGTGG AGGCCAGACT TAGGCACAGC
1441     ACGATGCCCA CCACCACCAG TGTGCCGCAC AAGGCCGTGG CGGTAGGGTA TGTGTCTGAA
1501     AATGAGCTCG GGGAGCGGGC TTGCACCGCT GACGCATTTG GAAGACTTAA GGCAGCGGCA
1561     GAAGAAGATG CAGGCAGCTG AGTTGTTGTG TTCTGATAAG AGTCAGAGGT AACTCCCGTT
1621     GCGGTGCTGT TAACGGTGGA GGGCAGTGTA GTCTGAGCAG TACTCGTTGC TGCCGCGCGC
1681     GCCACCAGAC ATAATAGCTG ACAGACTAAC AGACTGTTCC TTTCCATGGG TCTTTTCTGC
1741     AGTCACCGTC CTTGACACGA AGCTTCGCGA CGTACGTTCG AACCCGGGCA CGTGCGGACC
1801     GAATTCATTG ATCATAATCA GCCATACCAC ATTTGTAGAG GTTTTACTTG CTTTAAAAAA
1861     CCTCCCACAC CTCCCCCTGA ACCTGAAACA TAAAATGAAT GCAATTGTTG TTGTTAACTT
1921     GTTTATTGCA GCTTATAATG GTTACAAATA AAGCAATAGC ATCACAAATT TCACAAATAA
1981     AGCATTTTTT TCACTGCATT CTAGTTGTGG TTTGTCCAAA CTCATCAATG TATCTTATCA
2041     TGTCTGGCGG CCGCGACCTG CAGGCGCAGA ACTGGTAGGT ATGGAAGATC CCTCGAGATC
2101     CATTGTGCTG GCGGTAGGCG AGCAGCGCCT GCCTGAAGCT GCGGGCATTC CCGATCAGAA
2161     ATGAGCGCCA GTCGTCGTCG GCTCTCGGCA CCGAATGCGT ATGATTCTCC GCCAGCATGG
2221     CTTCGGCCAG TGCGTCGAGC AGCGCCCGCT TGTTCCTGAA GTGCCAGTAA AGCGCCGGCT
2281     GCTGAACCCC CAACCGTTCC GCCAGTTTGC GTGTCGTCAG ACCGTCTACG CCGACCTCGT
2341     TCAACAGGTC CAGGGCGGCA CGGATCACTG TATTCGGCTG CAACTTTGTC ATGCTTGACA
2401     CTTTATCACT GATAAACATA ATATGTCCAC CAACTTATCA GTGATAAAGA ATCCGCGCCA
2461     GCACAATGGA TCTCGAGGTC GAGGGATCTC TAGAGGATCC TCTACGCCGG ACGCATCGTG
2521     GCCGGCATCA CCGGCGCCAC AGGTGCGGTT GCTGGCGCCT ATATCGCCGA CATCACCGAT
2581     GGGGAAGATC GGGCTCGCCA CTTCGGGCTC ATGAGCGCTT GTTTCGGCGT GGGTATGGTG
2641     GCAGGCCCCG TGGCCGGGGG ACTGTTGGGC GCCATCTCCT TGCATGCACC ATTCCTTGCG
2701     GCGGCGGTGC TCAACGGCCT CAACCTACTA CTGGGCTGCT TCCTAATGCA GGAGTCGCAT
2761     AAGGGAGAGC GTCGACCTCG GGCCGCGTTG CTGGCGTTTT TCCATAGGCT CCGCCCCCCT
2821     GACGAGCATC ACAAAAATCG ACGCTCAAGT CAGAGGTGGC GAAACCCGAC AGGACTATAA
2881     AGATACCAGG CGTTTCCCCC TGGAAGCTCC CTCGTGCGCT CTCCTGTTCC GACCCTGCCG
2941     CTTACCGGAT ACCTGTCCGC CTTTCTCCCT TCGGGAAGCG TGGCGCTTTC TCATAGCTCA
3001     CGCTGTAGGT ATCTCAGTTC GGTGTAGGTC GTTCGCTCCA AGCTGGGCTG TGTGCACGAA
3061     CCCCCCGTTC AGCCCGACCG CTGCGCCTTA TCCGGTAACT ATCGTCTTGA GTCCAACCCG
3121     GTAAGACACG ACTTATCGCC ACTGGCAGCA GCCACTGGTA ACAGGATTAG CAGAGCGAGG
3181     TATGTAGGCG GTGCTACAGA GTTCTTGAAG TGGTGGCCTA ACTACGGCTA CACTAGAAGA
3241     ACAGTATTTG GTATCTGCGC TCTGCTGAAG CCAGTTACCT TCGGAAAAAG AGTTGGTAGC
3301     TCTTGATCCG GCAAACAAAC CACCGCTGGT AGCGGTGGTT TTTTTGTTTG CAAGCAGCAG
3361     ATTACGCGCA GAAAAAAAGG ATCTCAAGAA GATCCTTTGA TCTTTTCTAC GGGGTCTGAC
3421     GCTCAGTGGA ACGAAAACTC ACGTTAAGGG ATTTTGGTCA TGAGATTATC AAAAAGGATC
3481     TTCACCTAGA TCCTTTTAAA TTAAAAATGA AGTTTTAAAT CAATCTAAAG TATATATGAG
3541     TAAACTTGGT CTGACAGTTA CCAATGCTTA ATCAGTGAGG CACCTATCTC AGCGATCTGT
3601     CTATTTCGTT CATCCATAGT TGCCTGACTC CCCGTCGTGT AGATAACTAC GATACGGGAG
3661     GGCTTACCAT CTGGCCCCAG TGCTGCAATG ATACCGCGAG ACCCACGCTC ACCGGCTCCA
3721     GATTTATCAG CAATAAACCA GCCAGCCGGA AGGGCCGAGC GCAGAAGTGG TCCTGCAACT
3781     TTATCCGCCT CCATCCAGTC TATTAATTGT TGCCGGGAAG CTAGAGTAAG TAGTTCGCCA
3841     GTTAATAGTT TGCGCAACGT TGTTGCCATT GCTACAGGCA TCGTGGTGTC ACGCTCGTCG
3901     TTTGGTATGG CTTCATTCAG CTCCGGTTCC CAACGATCAA GGCGAGTTAC ATGATCCCCC
3961     ATGTTGTGCA AAAAAGCGGT TAGCTCCTTC GGTCCTCCGA TCGTTGTCAG AAGTAAGTTG
4021     GCCGCAGTGT TATCACTCAT GGTTATGGCA GCACTGCATA ATTCTCTTAC TGTCATGCCA
4081     TCCGTAAGAT GCTTTTCTGT GACTGGTGAG TACTCAACCA AGTCATTCTG AGAATAGTGT
4141     ATGCGGCGAC CGAGTTGCTC TTGCCCGGCG TCAATACGGG ATAATACCGC GCCACATAGC
4201     AGAACTTTAA AAGTGCTCAT CATTGGAAAA CGTTCTTCGG GGCGAAAACT CTCAAGGATC
4261     TTACCGCTGT TGAGATCCAG TTCGATGTAA CCCACTCGTG CACCCAACTG ATCTTCAGCA
4321     TCTTTTACTT TCACCAGCGT TTCTGGGTGA GCAAAAACAG GAAGGCAAAA TGCCGCAAAA
4381     AAGGGAATAA GGGCGACACG GAAATGTTGA ATACTCATAC TCTTCCTTTT TCAATATTAT
4441     TGAAGCATTT ATCAGGGTTA TTGTCTCATG AGCGGATACA TATTTGAATG TATTTAGAAA
4501     AATAAACAAA TAGGGGTTCC GCGCACATTT CCCCGAAAAG TGCCACCTGA CGTCTAAGAA
4561     ACCATTATTA TCATGACATT AACCTATAAA AATAGGCGTA TCACGAGGCC CTGATGGCTC
4621     TTTGCGGCAC CCATCGTTCG TAATGTTCCG TGGCACCGAG GACAACCCTC AAGAGAAAAT
4681     GTAATCACAC TGGCTCACCT TCGGGTGGGC CTTTCTGCGT TTATAAGGAG ACACTTTATG
4741     TTTAAGAAGG TTGGTAAATT CCTTGCGGCT TTGGCAGCCA AGCTAGATCC GGCTGTGGAA
4801     TGTGTGTCAG TTAGGGTGTG GAAAGTCCCC AGGCTCCCCA GCAGGCAGAA GTATGCAAAG
4861     CATGCATCTC AATTAGTCAG CAACCAGGTG TGGAAAGTCC CCAGGCTCCC CAGCAGGCAG
4921     AAGTATGCAA AGCATGCATC TCAATTAGTC AGCAACCATA GTCCCGCCCC TAACTCCGCC
4981     CATCCCGCCC CTAACTCCGC CCAGTTCCGC CCATTCTCCG CCCCATGGCT GACTAATTTT
5041     TTTTATTTAT GCAGAGGCCG AGGCCGCCTC GGCCTCTGAG CTATTCCAGA AGTAGTGAGG
5101     AGGCTTTTTT GGAGGCCTAG GCTTTTGCAA AAAGCTAGCT TGGGGCCACC GCTCAGAGCA
5161     CCTTCCACCA TGGCCACCTC AGCAAGTTCC CACTTGAACA AAAACATCAA GCAAATGTAC
5221     TTGTGCCTGC CCCAGGGTGA GAAAGTCCAA GCCATGTATA TCTGGGTTGA TGGTACTGGA
5281     GAAGGACTGC GCTGCAAAAC CCGCACCCTG GACTGTGAGC CCAAGTGTGT AGAAGAGTTA
5341     CCTGAGTGGA ATTTTGATGG CTCTAGTACC TTTCAGTCTG AGGGCTCCAA CAGTGACATG
5401     TATCTCAGCC CTGTTGCCAT GTTTCGGGAC CCCTTCCGCA GAGATCCCAA CAAGCTGGTG
5461     TTCTGTGAAG TTTTCAAGTA CAACCGGAAG CCTGCAGAGA CCAATTTAAG GCACTCGTGT
5521     AAACGGATAA TGGACATGGT GAGCAACCAG CACCCCTGGT TTGGAATGGA ACAGGAGTAT
5581     ACTCTGATGG GAACAGATGG GCACCCTTTT GGTTGGCCTT CCAATGGCTT TCCTGGGCCC
5641     CAAGGTCCGT ATTACTGTGG TGTGGGCGCA GACAAAGCCT ATGGCAGGGA TATCGTGGAG
5701     GCTCACTACC GCGCCTGCTT GTATGCTGGG GTCAAGATTA CAGGAACAAA TGCTGAGGTC
5761     ATGCCTGCCC AGTGGGAGTT CCAAATAGGA CCCTGTGAAG GAATCCGCAT GGGAGATCAT
5821     CTCTGGGTGG CCCGTTTCAT CTTGCATCGA GTATGTGAAG ACTTTGGGGT AATAGCAACC
5881     TTTGACCCCA AGCCCATTCC TGGGAACTGG AATGGTGCAG GCTGCCATAC CAACTTTAGC
5941     ACCAAGGCCA TGCGGGAGGA GAATGGTCTG AAGCACATCG AGGAGGCCAT CGAGAAACTA
6001     AGCAAGCGGC ACCGGTACCA CATTCGAGCC TACGATCCCA AGGGGGGCCT GGACAATGCC
6061     CGTCGTCTGA CTGGGTTCCA CGAAACGTCC AACATCAACG ACTTTTCTGC TGGTGTCGCC
6121     AATCGCAGTG CCAGCATCCG CATTCCCCGG ACTGTCGGCC AGGAGAAGAA AGGTTACTTT
6181     GAAGACCGCC GCCCCTCTGC CAATTGTGAC CCCTTTGCAG TGACAGAAGC CATCGTCCGC
6241     ACATGCCTTC TCAATGAGAC TGGCGACGAG CCCTTCCAAT ACAAAAACTA ATTAGACTTT
6301     GAGTGATCTT GAGCCTTTCC TAGTTCATCC CACCCCGCCC CAGAGAGATC TTTGTGAAGG
6361     AACCTTACTT CTGTGGTGTG ACATAATTGG ACAAACTACC TACAGAGATT TAAAGCTCTA
6421     AGGTAAATAT AAAATTTTTA AGTGTATAAT GTGTTAAACT ACTGATTCTA ATTGTTTGTG
6481     TATTTTAGAT TCCAACCTAT GGAACTGATG AATGGGAGCA GTGGTGGAAT GCCTTTAATG
6541     AGGAAAACCT GTTTTGCTCA GAAGAAATGC CATCTAGTGA TGATGAGGCT ACTGCTGACT
6601     CTCAACATTC TACTCCTCCA AAAAAGAAGA GAAAGGTAGA AGACCCCAAG GACTTTCCTT
6661     CAGAATTGCT AAGTTTTTTG AGTCATGCTG TGTTTAGTAA TAGAACTCTT GCTTGCTTTG
6721     CTATTTACAC CACAAAGGAA AAAGCTGCAC TGCTATACAA GAAAATTATG GAAAAATATT
6781     CTGTAACCTT TATAAGTAGG CATAACAGTT ATAATCATAA CATACTGTTT TTTCTTACTC
6841     CACACAGGCA TAGAGTGTCT GCTATTAATA ACTATGCTCA AAAATTGTGT ACCTTTAGCT
6901     TTTTAATTTG TAAAGGGGTT AATAAGGAAT ATTTGATGTA TAGTGCCTTG ACTAGAGATC
6961     ATAATCAGCC ATACCACATT TGTAGAGGTT TTACTTGCTT TAAAAAACCT CCCACACCTC
7021     CCCCTGAACC TGAAACATAA AATGAATGCA ATTGTTGTTG TTAACTTGTT TATTGCAGCT
7081     TATAATGGTT ACAAATAAAG CAATAGCATC ACAAATTTCA CAAATAAAGC ATTTTTTTCA
7141     CTGCATTCTA GTTGTGGTTT GTCCAAACTC ATCAATGTAT CTTATCATGT CTGGATCTAG
7201     CTTCGTGTCA AGGACGGTGA CTGCAGTGAA TAATAAAATG TGTGTTTGTC CGAAATACGC
7261     GTTTTGAGAT TTCTGTCGCC GACTAAATTC ATGTCGCGCG ATAGTGGTGT TTATCGCCGA
7321     TAGAGATGGC GATATTGGAA AAATCGATAT TTGAAAATAT GGCATATTGA AAATGTCGCC
7381     GATGTGAGTT TCTGTGTAAC TGATATCGCC ATTTTTCCAA AAGTGATTTT TGGGCATACG
7441     CGATATCTGG CGATAGCGCT TATATCGTTT ACGGGGGATG GCGATAGACG ACTTTGGTGA
7501     CTTGGGCGAT TCTGTGTGTC GCAAATATCG CAGTTTCGAT ATAGGTGACA GACGATATGA
7561     GGCTATATC




 
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